RECOGIDA Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS

Toda la información diagnóstica que puede generar el laboratorio de microbiología depende en gran medida de la muestra enviada. Esta no sólo tiene que ser la adecuada, sino que además debe cumplir unos requisitos que aseguren su idoneidad y en consecuencia la calidad de nuestro trabajo. La idoneidad de las muestras enviadas depende del cumplimiento de una serie de medidas o reglas referentes a: procedimiento de obtención, cantidad enviada y transporte rápido y adecuado al laboratorio. Todas las normas y recomendaciones sobre estos aspectos se encuentran detalladas en el documento técnico. Las consecuencias de una muestra mal tomada y/o mal enviada pueden suponer un fracaso en el aislamiento del agente etiológico o el aislamiento de posibles microorganismos contaminantes que pueden generar tratamientos innecesarios o inadecuados. Para asegurar la idoneidad de las muestras que recibe, el laboratorio de microbiología debe elaborar un manual claro y conciso de las normas de recogida y transporte de las mismas. Dicho manual debe distribuirse en controles de enfermería, consultas y demás dependencias hospitalarias y ambulatorias en las que se asista a los pacientes.

Normas generales

1. Obtención de muestras:

• Deben realizarse en condiciones de máxima asepsia, evitando contaminaciones ambientales, del personal médico y del propio enfermo.

• No debe estar en contacto con sustancias desinfectantes.

2. Cumplimentación del volante. Precisa:

• Identificación del paciente.

• Identificación del médico.

• Datos de la muestra (hora de recogida, tipo de muestra, localización anatómica, procedimiento de obtención de la muestra).

• Determinaciones solicitadas.

3. Identificación de la muestra:

Cada muestra debe estar acompañada siempre de un volante. El RECIPIENTE debe identificarse con nombre y apellidos, tipo de muestra, fecha, y hora de extracción (IMPRESCINDIBLE en isolator). EL volante y el sobre deberán  tener etiqueta de color según su conservación:

• Rojo: en estufa.

• Azul: en nevera.

• Amarillo: a Temperatura ambiente.

	Envase estéril de boca ancha
	Port-A-Cul vial
	Port-A-Cul tubo
	Hisopo con medio de Stuart
	Tubos estériles de tapón verde
	Medio transporte para virus
	Tubo plástico
	Frascos hemocultivos adultos Bactec
	Frasco hemocultivo pediátrico Bactec
	Isolator adulto-10 I. pediátrico-1,5
	Contenedor especial Para-Pak
	Transporte para Chlamydias

  Medios de transporte

1. Envase estéril de boca ancha:

• Para: biopsias, tejidos, orinas, escamas, líquidos, esputos, secreciones bronquiales.

• Estudia: micobacterias, aerobios, hongos, antígeno de Legionella y Neumococo.

2. Port-A-Cul vial (medio de Cary Blair):

• Para: líquidos y exudados obtenidos por aspiración.

• Estudia: aerobios, anaerobios, hongos y micobacterias.

3. Port-A-Cul tubo (medio de Cary Blair):

• Para: raspados de heridas, escaras, abscesos, úlceras, pequeñas biopsias y tejidos.

• Estudia: aerobios, anaerobios y hongos.

4. Hisopo con medio de transporte Stuart:

• Para: abscesos y heridas recogidas con escobillón.

• Estudia: aerobios y hongos.

• No válido para: anaerobios y micobacterias.

5. Tubo estéril de tapón verde:

• Para: líquidos estériles.

• Estudia: micobacterias, aerobios y hongos.

• No válido para: anaerobios, ni para líquidos con alto contenido hemático.

6. Medio de transporte para virus:

• Para: aspirados nasofaríngeos, exudados y biopsias.

• Estudia: virus.

7. Tubo de plástico estéril:

• Para: catéteres (no más de 4 cm), tejidos y líquidos.

• Estudia: aerobios, hongos, micobacterias.

• Precisa 3-4 ml por frasco.

8. Hemocultivos adultos:

• Para: sangre y líquidos estériles.

• Estudia: aerobios, anaerobios y hongos levaduriformes.

• Precisa 10 ml por frasco.

9. Hemocultivos pediátricos:

• Para: sangre y líquidos estériles.

• Estudia: aerobios y hongos levaduriformes.

10. Isolator:

• Para: sangre.

• Estudia: infecciones de catéter, micobacterias, brucelosis, legionella, bartonella y hongos filamentosos.

11. Contenedor especial Para-Pak:

• Para: heces.

• Estudia: aerobios y hongos.

• Nota: Para el estudio de Clostridium difficile, Rotavirus y Cryptosporidium, RECIPIENTE ESTÉRIL DE BOCA ANCHA.

12. Medio de transporte para Chlamydias:

• Para: muestras vaginales y balano-prepuciales.

• Estudia: Chlamydias.

  Conservación de las muestras

• Muestras para virus: en NEVERA, salvo sangre, médula ósea, y Ag CMV.

• Muestras para hongos: en NEVERA, salvo LCR, piel, pelo, uñas, vaginal y balano-prepucial.

• Muestras para anaerobios: a Temperatura ambiente.

• Muestras para micobacterias: en NEVERA, salvo contenido gástrico.

• Muestras para Bacteriología:

  • A temperatura ambiente: médula ósea, líquidos estériles (pleural, peritoneal, articular,...), muestras oculares, muestras de cavidad oral, heridas, abscesos, fístulas, adenopatías, del tracto genital, y biopsias.

  • En NEVERA: orinas, heces, catéteres.

  • En ESTUFA: hemocultivos, LCR, placas y tubos inoculados.

• Según el microorganismo a investigar:

  • ANAEROBIOS: Máxima asepsia. ASPIRAR. Conservación a Tª ambiente. Enviar en PORT-A-CUL.

  • MICOBACTERIAS: No recoger con escobillón. Conservar en nevera. Enviar en envases estériles de boca ancha. Rapidez en envío.

  • HONGOS: ASPIRAR Y RASPAR. Conservar en nevera (excepto tracto genital, uñas, pelo,...). Rapidez en envío.

  • VIRUS: Tomar muestras en estadio precoz. Transporte específico. Conservación en nevera.

  Criterios de rechazo de una muestra

• Mala cumplimentación del volante y/o de la muestra.

• Muestras derramadas, o rotas,...

• Muestra no adecuada para la prueba solicitada.

• Muestras sin medio de transporte adecuado.

Instrucciones específicas

1. Sangre:

	Frascos hemocultivos adultos Bactec
	Frasco hemocultivo pediátrico Bactec

  1.a.  Hemocultivo:

• Muestra: sangre.

• Volumen: 10 ml en adultos cada uno de los 2 frascos.

• Recipiente: frascos hemocultivo BACTEC.

• Consideraciones: desinfección adecuada, evitando la entrada de aire en los frascos de anaerobiosis.

  1.b.  Sangre para hongos levaduriformes:

• Muestra: sangre.

• Volumen: 10 ml  por cada frasco.

• Recipiente: frascos hemocultivo BACTEC.

	Isolator adulto-10 I. pediátrico-1,5

  1.c.  Sangre para Mycobacterias, hongos filamentosos, microorganismos de crecimiento intracelular. Para infecciones por catéter:

• Muestra: sangre.

• Volumen: 10 ml (en pediátrico de 2 a 5 ml).

• Recipiente: tubos de Isolator.

• Consideraciones: para hongos filamentosos, Mycobacterium y microorganismos de crecimiento intracelular. Para infecciones por catéter. Especificar “mantener larga incubación”, pues pueden tardar 4 semanas en crecer.

2. Vías respiratorias:

	Hisopo con medio de Stuart

  2.a.  Nariz:

• Muestra: frotis de fosas nasales.

• Volumen: 1 torunda.

• Recipiente: medio de transporte Stuart.

  2.b.  Garganta:

• Muestra: frotis de faringe posterior, de úlceras, o lesiones purulentas.

• Volumen: 1 torunda.

• Recipiente: medio de transporte Stuart.

	Envase estéril de boca ancha

  2.c.  Esputo:

• Muestra: esputo (no saliva).

• Volumen: 2 ml.

• Recipiente: envase estéril de boca ancha.

  2.d.  Aspirado bronquial:

• Muestra: aspirado bronquial, transtraqueal o muestra de broncoscopia.

• Volumen: 1 ml.

• Recipiente: envase estéril.

3. Heces:

	Contenedor especial Para-Pak

  3.a.  Coprocultivo habitual:

• Muestra: muestra de heces.

• Volumen: 1 g de heces.

• Recipiente: contenedor especial Para-pak.

• Consideraciones: estudio de Salmonella, Shigella, y Campylobacter.

	Contenedor especial Para-Pak

  3.b.  Para Yersinia, E. coli:

• Muestra: muestra de heces.

• Volumen: 1 g de heces.

• Recipiente: contenedor especial Para-pak.

  3.c.  Para Aeromonas y Plesiomonas:

• Muestra: muestra de heces.

• Volumen: 1 g de heces.

• Recipiente: contenedor especial Para-pak.

4. Aparato génito-urinario:

	Envase estéril de boca ancha

  4.a.  Orina:

• Muestra: micción media.

• Volumen: 0,5 ml.

• Recipiente: envase estéril de boca ancha.

• Consideraciones: primera micción de la mañana.

  4.b.  Secreciones urogenitales:

• Muestra: secreciones vaginales o uretrales, torundas de cérvix, líquido prostático,...

• Volumen: 1 torunda ó 0,5 ml.

• Recipiente: medio de transporte Stuart (en muestras líquidas usa el tubo estéril de tapón verde).

• Consideraciones: para estudio de Chlamydias utilizar medio de transporte específico.

Hisopo con medio de Stuart	Tubo estéril de tapón verde	Transporte para Chlamydias

5. Líquidos corporales, aspirados y tejidos:

	Tubos estériles de tapón verde

  5.a.  LCR:

• Muestra: líquido cefaloraquídeo.

• Volumen: 1 ml habitualmente, ≥ 5 ml para micobacterias.

• Recipiente: tubo estéril de tapón verde.

• Consideraciones: enviar el segundo tubo de extracción.

	Tubos estériles de tapón verde

  5.b.  Líquidos corporales:

• Muestra: líquidos aspirados de forma aséptica.

• Volumen: 1 ml.

• Recipiente: tubo estéril de tapón verde.

  5.c.  Heridas:

• Muestra: material purulento o contenido de abscesos.

• Volumen: 2 torundas ó 0,5 ml de pus aspirado.

• Recipientes:

  • para estudio de aerobios: medio de transporte Stuart.

  • para  estudio de aerobios/anaerobios:

    • muestras líquidas: Port-a-cull vial.

    • muestras sólidas: Port-a-cull tubo.

Hisopo con medio de Stuart	Port-A-Cul vial	Port-A-Cul tubo

  5.d.  Biopsia y materiales aspirados:

• Muestra: tejido extirpado mediante cirugía, hueso,...

• Volumen: 1 ml de líquido ó 1 gr de tejido.

• Recipientes:

  • para estudio de aerobios: medio de transporte Stuart.

  • para  estudio de aerobios/anaerobios:

    • muestras líquidas: Port-a-cull vial.

    • muestras sólidas: Port-a-cull tubo.

Hisopo con medio de Stuart	Port-A-Cul vial	Port-A-Cul tubo

6. Recomendaciones especiales:

	Envase estéril de boca ancha

  6.a.  Hongos:

• Muestra: pueden utilizarse las muestras antes mencionadas. El esputo y la orina deben obtenerse de la primera muestra de la mañana.

• Volumen: 1 ml o lo especificado en cada muestra. En orina se requiere más volumen.

• Recipientes: envase estéril de boca ancha.

  6.b.  Mycobacterium:

• Muestra: esputo, tejido, orina, líquidos corporales.

• Volumen: 10 ml ó 1 gr de tejido. No usar torundas.

• Recipientes: envase estéril de boca ancha o tubo estéril de tapón verde.

Envase estéril de boca ancha	Tubos estériles de tapón verde

  6.c.  Legionella / S. pneumoniae:

	Envase estéril de boca ancha

• Muestra: muestra de orina.

• Volumen: 1 ml.

• Recipientes: envase estéril de boca ancha.

• Consideraciones: detección de Ag de Legionella y Neumococo en orina mediante técnica de cromatografía.

  6.d.  Anaerobios:

• Muestra: aspirados o líquidos corporales.

• Volumen: 1 ml de líquido o 2 torundas.

• Recipientes:

  • muestras líquidas: Port-a-cull vial.

  • muestras sólidas: Port-a-cull tubo.

Port-A-Cul vial	Port-A-Cul tubo

  6.e.  Virus:

• Muestra: secreciones respiratorias, lavado de vías respiratorias, torundas nasales, torundas, vaginales y rectales, lesiones cutáneas sospechosas, heces, sangre,...

• Volumen: 1 ml de líquido, 1 torunda, ó 1 gr de heces.

• Recipientes: medio de transporte específico para virus.

• Consideraciones: para el estudio de virus en heces se usa el envase estéril de boca ancha.

Medio de transporte para virus	Envase estéril de boca ancha