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A. Material necesario
• Frascos de hemocultivo.
• Compresores de goma.
• Jeringas y agujas de punción IV.
• Gasas estériles.
• Guantes de goma estériles.
• Alcohol etílico o isopropílico al 70%.
• Solución Yodada.
B. Obtención de la muestra
• Retirar los tapones externos de los frascos.
• Desinfectar los tapones de goma con alcohol etílico al 70%,
dejándolo secar al menos un minuto (no utilizar antiséptico yodado).
• Eliminar cualquier gota de desinfectante residual con una gasa
estéril antes de la inoculación de la sangre.
• Localizar por palpación la vena que se va a puncionar. Debe
utilizarse una vena distinta para cada extracción. Cuando no haya venas
accesibles puede realizarse la extracción de sangre arterial.
• Desinfectar con alcohol etílico o isopropílico al 70% una zona de
piel de unos 10 cm
de diámetro. Se comenzará por el centro y se irán haciendo círculos
concéntricos hacia el exterior. Dejar que se seque durante un mínimo de 30
segundos.
• Repetir el paso anterior aplicando una solución yodada, dejándolo
secar durante 30 segundos si se trata de tintura de yodo al 1-2% y durante 60
segundos si se utiliza povidona yodada al 10%.
• En pacientes alérgicos al yodo, repetir la operación utilizando
alcohol al 70% y dejándolo secar durante 60 segundos.
• Extraer la sangre sin tocar en ningún momento el campo desinfectado.
Si fuera necesario palpar nuevamente la vena se utilizarán
guantes de goma estériles o se desinfectarán los dedos de la misma manera que
la piel del paciente. Si se requiere una segunda venopunción deberá cambiarse
la aguja.
•Introducir la sangre en los frascos, primero en el frasco de
anaerobios evitando que entre aire en dicho frasco. Mover los frascos para
que la sangre y el medio de cultivo se mezclen. Introducir los frascos a 37ºC.
C. Volumen de la muestra
• Como norma general lo más adecuado es que la sangre mantenga una
proporción 1:10 con el medio de cultivo.
• La cantidad de sangre a introducir en cada frasco viene determinada
por el modelo utilizado en el hospital:
- Adultos y niños mayores: obtener de 10-20ml por toma para inocular ambos
frasco (frasco para cultivo de aerobios + frasco para cultivo de anaerobios).
- En prematuros y niños pequeños: obtener de 0.2 a 5ml de sangre a
repartir entre ambos frascos especiales para Pediatría.
C. Numero de muestras y momento de la
extracción
• En general se recomienda extraer tres hemocultivos por paciente,
previos al tratamiento antimicrobiano.
• En caso de sepsis y endocarditis subaguda las extracciones se
reparten en
24 horas y en caso de que los hemocultivos sean negativos, obtener tres
muestras más al día siguiente.
• El comienzo de obtención de hemocultivos debe demorarse el menor
tiempo posible desde el inicio de la fiebre o de los escalofríos.
• El intervalo entre las extracciones en general debe ser de unos 30
minutos, si bien recientemente la American Society for Microbiology ha
recomendado la conveniencia de extracciones simultaneas en diferentes
puntos anatómicos.
D. Transporte
• Deben enviarse al laboratorio lo más rápidamente posible. Hasta su envío
mantener a 35-37ºC;
cuando esto no sea posible, mantener a temperatura ambiente. Nunca
refrigerarse ni congelar.
E. Observaciones
• No son adecuadas las muestras obtenidas a través de catéter. Estas muestras
sólo deberían utilizarse en el caso de sospecha de sepsis asociada a catéter,
siempre que en el laboratorio se pudieran hacer cultivos
cuantitativos de sangre (ésta técnica aún no está disponible en el Hospital).
• Consultar siempre con el Laboratorio de Microbiología ante la sospecha de
una bacteriemia por microorganismos “inhabituales” o “de difícil
crecimiento”.
•En caso de sospecha de determinados microorganismos (Brucella spp, Neisseria
gonorrhoeae,...) o de endocarditis, indicarlo claramente en la petición.
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